ПЦР-анализ: что это такое, когда он назначается и как проводится?
Один из наиболее передовых и точных способов проведения диагностики - это метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Нобелевскую премию за создание данного метода получил Кэри Муллис в 1993 году. Благодаря этому уникальному лабораторному методу диагностики можно обнаружить различные заболевания еще на стадии их зачатия. В данной статье вы узнаете, как проводится ПЦР-диагностика, когда его назначают для исследования и как необходимо готовиться к данному анализу.
Метод ПЦР, основанный на принципах молекулярной биологии, широко используется в диагностике многих заболеваний. Суть этого подхода заключается в использовании специальных ферментов, которые многократно копируют фрагменты РНК и ДНК возбудителей болезни, которые находятся в биологических пробах, например в крови.После этого специалисты лаборатории проводят анализ полученных фрагментов, сверяя их со специальной базой данных. Это позволяет выявить тип возбудителя болезни и определить его концентрацию в биоматериале.
Для проведения ПЦР-диагностики используется амплификатор - специальное устройство, которое нагревает и охлаждает пробирки с биологическим материалом. Нагревание и охлаждение необходимы для проведения репликации. При этом точность температурного режима оказывает существенное влияние на точность результата.
Какие сферы применения у метода ПЦР?
Метод ПЦР, или полимеразной цепной реакции, имеет широкий спектр применения в медицине. Он позволяет выявлять различные инфекции и используется для диагностики ВИЧ, герпеса, половых инфекций, кандидоза, гепатитов, мононуклеоза, листериоза, цитомегаловируса, туберкулеза, вируса папилломы человека и клещевого энцефалита [3, 4]. Метод ПЦР также применяется для диагностики вирусных заболеваний, включая коронавирусную инфекцию COVID-19, что особенно актуально в условиях сложной эпидемиологической обстановки.
Кроме того, метод ПЦР используется в криминалистике при необходимости определить, кому принадлежит найденный на месте преступления биоматериал. Он может использоваться также для установления отцовства [1, 2]. Таким образом, метод ПЦР находит свое применение в различных сферах, включая медицину и криминалистику.
Список литературы:
- Измерова, Т. В. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
- Полимеразная цепная реакция (PCR). Справочник по биологии
- Рындак, А. В. ПЦР диагностика (Полимеразная цепная реакция)
- PCR (polymerase chain reaction). Healthdirect
Преимущества и недостатки метода ПЦР-диагностики
Преимущества метода ПЦР-диагностики включают высокую чувствительность, универсальность, широкий охват, оперативность и точность. Благодаря высокой чувствительности метода, можно обнаружить возбудителя болезни даже при наличии нескольких молекул его ДНК, т.е. на ранних стадиях заболевания, при хронической форме заболевания и в случаях латентного протекания болезни. Метод ПЦР-диагностики подходит для исследования почти любого биоматериала - от крови и слюны до клеток кожи. Широкий охват также позволяет выявить сразу нескольких возбудителей болезни. Кроме того, результат обычно готов через 5-7 часов, что позволяет получить заключение уже на следующий день после забора биоматериала. Метод ПЦР-диагностики практически не дает ложноположительных или ложноотрицательных результатов, если была соблюдена технология проведения анализа.
Однако существуют и недостатки метода ПЦР-диагностики. Высокие требования к соблюдению технологии и к профессионализму лаборантов необходимы для получения точных результатов. Если образец был загрязнен, анализ может дать ложный результат. Поэтому лучше проводить ПЦР-диагностику только в проверенных лабораториях, где внедрены системы контроля качества работы.
Изучаемый материал для ПЦР-диагностики заболеваний может быть различным, и выбор зависит от типа инфекции. Например, при анализе на ЗППП методом ПЦР используют соскоб или мазок из шейки матки или уретры, а также мочу. Для обнаружения герпеса, цитомегаловируса, гепатита, токсоплазмоза и ВИЧ, необходима кровь. Мазок из зева используется для анализа на мононуклеоз и цитомегаловирус. В случае поражений нервной системы, спинномозговая жидкость является подходящим материалом для анализа. Ткани плаценты изучаются для выявления внутриутробных инфекций, а для обнаружения легочных инфекций используют мокроту или плевральную жидкость.Готовимся к исследованию
Подготовка к ПЦР-диагностике напрямую зависит от типа биоматериала. Кровь для анализа следует сдавать натощак утром. Что касается мочи, то ее необходимо собирать утром в стерильный контейнер и доставлять в лабораторию в течение двух часов. Если вы собираетесь взять мазок или соскоб из урогенитальной области, необходимо воздержаться от полового контакта несколько дней до исследования, также не следует проводить спринцевания. Убедитесь, что сдача анализа не приходится на время менструации. Пациент, который принимает лекарственные препараты или БАД, обязательно должен сообщить об этом врачу. Существует вероятность того, что будет необходимо остановить курс приема, поскольку действующие вещества могут повлиять на результаты лабораторного анализа.
Методы ПЦР-диагностики: что нужно знать
Когда дело доходит до ПЦР-диагностики заболеваний, есть несколько различных методов, которые используются сегодня. Многие врачи предпочитают ПЦР в реальном времени из-за его высокой точности и быстроты обработки образцов. Кроме этого, на сегодняшний день существуют также методы секвенирования, пиросеквенирования и микрофлюидных технологий.
Однако, ПЦР в реальном времени остается самым популярным способом диагностики. Данный метод практически не дает ложноположительных результатов, при этом срок обработки образцов заметно уменьшается – результат можно получить уже через час. Если вы ищете точный и эффективный способ диагностики заболеваний, то выбор ПЦР в реальном времени будет для вас идеальным решением.
Как правильно понимать результаты ПЦР-исследования
Результат ПЦР-анализа для пациента может быть либо положительным, либо отрицательным. Отрицательный результат означает отсутствие следов враждебной ДНК и хорошее здоровье. Положительный результат, наоборот, указывает на наличие фрагментов ДНК возбудителя болезни, что говорит о заражении и необходимости лечения.
Нередко ПЦР-диагностика показывает положительный результат, хотя пациент не испытывает никакого дискомфорта и не имеет признаков заболевания. Это означает, что болезнь находится в очень ранней стадии. В таких случаях необходимы дополнительные обследования и лечение. Если заболевание было диагностировано рано, то лучше начинать лечение как можно быстрее, так как чем дальше зайдет болезнь, тем труднее будет ее вылечить.
ПЦР-анализ является невероятно точным методом диагностики инфекций: он может обнаружить возбудителя болезни, даже если в собранной пробе находится всего одна молекула его ДНК. Именно это свойство делает ПЦР-диагностику одним из самых эффективных инструментов для проверки наличия инфекции и контроля за эффективностью лечения.
Фото: freepik.com